Toxicity in food flavorings at the cellular level associated with each other at different doses / Toxicidade em nível celular de aromatizantes alimentares associados entre si em diferentes doses

This study aimed to examine the cytotoxicity and genotoxicity of synthetic flavorings, nature identical, Chocolate, Strawberry and Condensed Milk. This evaluation was performed in root meristem cells of Allium cepa L., in exposure times of 24 and 48 hours and using doses of 0.2; 0.4 and 0.6 mL, in combination, in which one of the three doses of a flavoring was combined with a different dose of one of the two other flavor additives studied. Roots were fixed in Carnoys solution, hydrolyzed in hydrochloric acid, stained with acetic orcein and then analyzed, under light microscopy, 5,000 cells for each treatment. For data analysis, it was used Chi-square test at 5%. All the treatments with combinations between the flavorings Chocolate/Strawberry and Strawberry/Condensed Milk reduced, in both exposure times considered, cell division of A. cepa roots, proving to be cytotoxic. In turn, the treatments with the association of Chocolate/Condensed Milk did not change significantly the mitotic index of the cells analyzed. The Strawberry flavoring was the most cytotoxic among the additives tested. None of the evaluated associations was genotoxic under the study conditions.

Objetivou-se nesta pesquisa avaliar a citoxicidade e genotoxicidade de aromatizantes alimentares sintéticos de chocolate, morango e leite condensado. Esta avaliação ocorreu por meio das células meristemáticas de raízes de A. cepa L., nos tempos de exposição de 24 e 48h e nas doses de 0,2; 0,4 e 0,6 mL, em associação, em que para uma das três doses de um dos aromatizantes associou-se uma dose diferente de um dos outros dois aditivos de aroma em estudo. Em seguida, as raízes foram fixadas em solução de Carnoy, hidrolisadas em ácido clorídrico e coradas com orceína acética. Analisaram-se, em microscópio óptico, 5.000 células para cada grupo tratamento, e utilizou-se o teste estatístico Qui-quadrado a 5% para análise dos dados. A partir dos resultados, verificou-se que todos os tratamentos decorrentes das associações entre chocolate/morango e morango/leite condensado reduziram, nos dois tempos de exposição considerados, a divisão celular das raízes A. cepa, mostrando-se citotóxicos. Já os tratamentos provenientes da associação chocolate/leite condensado não alteraram de forma significativa os índices mitóticos das células do tecido em análise. Foi possível inferir que o aditivo de morango foi o mais citotóxico dos aditivos em estudo. Nenhuma das associações avaliadas foi genotóxica nestas condições de estudo.

On frogs, toxins and true friendship: an atypical case report

The authors report a series of events including the scientific interest for poisonous dendrobates of French Guiana, the human confrontation with the immensity of the evergreen rainforest, the fragility of the best-prepared individuals to a rough life, and the unique and very special manifestation of a solid friendship between two experts and enthusiasts of outdoor life. In the evergreen forest of South America, as in many other scientific field expeditions, everything may suddenly go wrong, and nothing can prepare researchers to accidents that may occur in a succession of uncontrollable errors once the first mistake is done. This is what happened during an expedition in search for dendrobates by an experienced forest guide and naturalist. The authors decided to report the story, considering that it deserved to be brought to the attention of those interested in venomous animals and toxins, in order to illustrate the potential danger of dealing with these organisms.

Antinociceptive and anti-inflammatory effects of Lantana camara L. extract in mice / Efeitos antinociceptivos do extrato de Lantana camara L. em camundongos

ABSTRACT: he Lantana camara L. belongs to the family Verbenaceae, which contains several active compounds in leaves and roots and which are reported to have medicinal and insecticidal properties. Studies of plants within the same family show the existence of anti-inflammatory activity in paw edema induced by carrageenan, serotonin and histamine and analgesic activity in the acetic acid writhing and tail-flick tests. The present study investigated whether the L. camara extract (ACE) also exerts these effects. The ACE toxicity was studied in male mice, and the percentage of mortality recorded 7 days after treatment was assessed. The ACE was evaluated as an antinociceptive agent in the hot plate, tail-flick and acetic acid writhing tests at a nontoxic dose of 1.0 g/Kg. The results showed that 1.5 g/Kg of ACE was not able to cause death, and doses of 3.0 and 4.0 g/Kg caused 50% and 60% death, respectively, in male mice. In all of the antinociceptive tests, 1 g/Kg of ACE markedly reduced responses to pain. Our findings suggest that ACE may have active anti-inflammatory and antinociceptive properties in much smaller doses than toxic.

RESUMO: Lantana camara L. pertence à família Verbenaceae, a qual contem muitos princípios ativos em suas folhas e raízes com propriedade medicinais e inseticidas. Estudos com plantas da mesma família mostram a existência de propriedades antinflamatórias no modelo de edema de pata induzido pela carragenina, serotonina e histamina, além da atividade analgésica nos testes de contorção induzida pelo ácido acético e da retirada da cauda por estímulo térmico. O presente trabalho investigou os efeitos tóxicos e antinociceptivos do extrato de L. camara (ACE) em camundongos. Para tanto, investigou-se a porcentagem de mortes em 7 dias após a administração de diferentes doses do extrato. Avaliou-se também os efeitos antinociceptivos do ACE pelos testes da placa quente, estimulação térmica da cauda e contorções abdominais induzidas pelo ácido acético com a dose não-tóxica [1,0 g/Kg]. Os resultados mostraram que 1,5 g/Kg do ACE não causou mortalidade, enquanto que 3,0 e 4,0 g/Kg promoveram 50 e 60% de mortalidade, respectivamente. Em todos os testes antinociceptivos, a dose de 1,0 g/Kg do ACE reduziu a resposta à dor. Os presentes resultados indicam que o ACE apresenta propriedades antinflamatórias e analgésicas em doses muito menores que a tóxica.

Efeito do extrato etanólico bruto e das frações da Hyptidendron canum (Pohl ex Benth. ) Harley em brânquias de Oreochromis niloticus L / Effect of the crude ethanol extract and fractions of Hyptidendron canum (Pohl ex Benth. ) Harley on the gills of Oreochromis niloticus L

Alguns problemas relacionados à criação intensiva de peixes estão mais evidentes devido ao aumento da aquicultura em todo o mundo, destacando-se os distúrbios nutricionais e o aumento de doenças nos sistemas de produção. Com isso as pesquisas envolvendo produtos derivados de plantas vem ganhando espaço nessa área. A Hyptidendron canum é uma planta utilizada na medicina popular como antimalárica, anti-inflamatória, antiulcerativa e anti-hepatotóxica. Objetivou-se, neste trabalho, avaliar os efeitos celulares e teciduais do extrato etanólico bruto e das frações hexano, clorofórmio e acetato de etila da H. canum nas brânquias de Oreochromis niloticus L. Para isso, o extrato etanólico e as frações foram administrados no peixe através da ração. Após 24 horas da ingestão da ração, os peixes foram sacrificados e o segundo arco branquial de cada um foi processado histologicamente e corado com tricômico de Masson e Hematoxilina e Eosina (HE). Pela análise qualitativa das brânquias ao microscópio de luz, observou-se que o extrato bruto e as três frações promoveram, em diferentes intensidades nas lamelas, descamação e destacamento do epitélio respiratório, alteração da curvatura, desorganização do eixo, hiperplasia celular do tecido epitelial interlamelar e vasodilatação nas lamelas e no vaso central do filamento. Os resultados deste experimento mostraram que o extrato etanólico bruto e as três frações de H. canum promoveram processos inflamatórios e/ou lesões sistêmicas, dose dependente para O. niloticus.

Some problems related to intensive fish farming are more evident because of the increased aquaculture worldwide, and we highlight the nutritional disorders and the increase of diseases in the production systems. Thus, research involving plant-derived products has been increasing in this area. The Hyptidendron canum is a plant used in folk medicine as an antimalarial, anti-inflammatory, anti-ulcer and antihepatotoxic agent. This study proposes to evaluate the cellular and tissue effects of the crude ethanol extract and the hexane, chloroform and ethyl acetate fractions of H. canum on the gills of Oreochromis niloticus L. The ethanol extract and fractions were administered through the feed of the fish. Twenty-four hours later, the fish were sacrificed and their second gill arch dissected. Histological analyses were performed using Masson's trichrome and Haematoxylin and Eosin (H&E). The qualitative analysis of the material showed that the crude extract and the three fractions caused varying degrees of peeling and detachment of the lamellar respiratory epithelium, alterations in the curvature and axis of the gill, cell hyperplasia in the interlamellar epithelium and lamellar vasodilation, as well as vasodilation in the central vessel of the filament. The results of this experiment showed that the crude ethanol extract and the three fractions of H. canum promoted inflammation and/or systemic lesions, dose dependent, for O. niloticus.

Toxicidade reprodutiva do extrato hidroalcóolico de Samanea tubulosa Benth em ratas wistar / Reproductive toxicity study in Wistar rats treated with hydroalcoholic extract of the pods of bordão-de-velho (Samanea tubulosa Benth)

RESUMOO objetivo deste trabalho foi avaliar possíveis efeitos do extrato das vargens de bordão-de-velho (Samanea tubulosa benth) sobre a reprodução em ratas Wistar. O extrato foi preparado a partir da secagem e trituração das vagens, seguida por maceração com etanol e, posteriormente, concentrado em rotavapor. Ratas Wistar gestantes foram tratadas com 75 mg.100 g-1 de peso corporal de extrato de S. tubulosa e o grupo controle recebeu 1ml/100 g-1 de peso corporal de solução salina por gavagem durante 19 dias. Após eutanásia no 20º dia, as seguintes variáveis foram analisadas: peso corporal fetal, peso dos fetos e placentas, número de corpos lúteos e de reabsorções, implantação, fetos vivos e mortos. O extrato de vagens de S. tubulosa apresenta toxicidade para o feto causando malformações, reabsorções fetais e diminuição pronunciada do peso ao nascer. Contudo, o extrato de vagens de S. tubulosanão influencia no número de corpos lúteos e número de implantações.

ABSTRACTThe aim of this study was to evaluate possible effects of pods from bordão-de-velho (Samanea tubulosa benth) extract on the reproduction of female rats.The extract was prepared by maceration wtith ethanol of dried and crushed pods, then it was concentrated in rotary evaporator. The pregnant Wistar rats were treated with a dose of 75 mg.100 g-1of body weight of Samanea tubulosa extract, by gavage , whereas the control group received 1ml.100g-1of saline by the same route for 19 days. After the euthanasia of the animals at day 20th,the following variables were analyzed: fetal body weight, weight of fetuses and placentas, number of corpora lutea, resorption points, live and dead fetuses and number of embryonic implantations. The extract from S. tubulosa pods, at the dose studied, showed toxicity causing fetal abnormalities, fetal resorption and pronounced decrease in the weight of offspring at birth. On the other hand, , the treatment with extract of S.tubulosa pods had no influence over corpora lutea and implantation numbers.

Atividade antioxidante e toxicidade preliminar do extrato e frações obtidas das folhas e cascas do caule de Dasyphyllum tomentosum (Spreng. ) Cabrera / Antioxidant activity and preliminary toxicity of the extracts and fractions obtained from the leaves and stem bark of Dasyphyllum tomentosum (Spreng. ) Cabrera

Dasyphyllum tomentosum (Spreng.) Cabrera, açucará ou espinho-de-agulha, pertence à família Asteraceae, a qual compreende muitas espécies com propriedades terapêuticas. O objetivo deste trabalho foi avaliar extratos e frações de folhas e de cascas do caule de D. tomentosum, com relação as atividade antioxidante, citotóxica e hemolítica em testes in vitro. Todas as amostras apresentaram atividade antioxidante pelo método de inibição de DPPH, com destaque para a fração acetato de etila obtida das folhas cuja atividade foi comparável à dos padrões ácido ascórbico e rutina. Com relação à redução do complexo fosfomolibdênio, observou-se que esta mesma fração foi semelhante somente a rutina enquanto a fração obtida das cascas do caule apresentou resultado superior. Não foi observada atividade citotóxica e hemolítica frente aos modelos utilizados com os extratos e frações. Os resultados obtidos demonstram o potencial antioxidante da espécie sem apresentar toxicidade.

Dasyphyllum tomentosum (Spreng.) Cabrera, which belongs to the Asteraceae family, is well known for having many species with therapeutic properties. The aim of this study was to evaluate the extracts and fractions from the leaves and stem bark of D. tomentosum with respect to the antioxidant, cytotoxic and hemolytic activity in in vitro tests. All samples showed antioxidant activity by the DPPH inhibition method, especially the ethyl acetate fraction obtained from the leaves, whose activity was comparable to that of standard ascorbic acid and rutin. Regarding the reduction of the phosphomolybdenum complex, we noted that this same fraction was only similar to rutin and the fraction obtained from the stem bark showed superior results. There was no cytotoxicity and hemolytic activity compared to the models used in the extracts and fractions. The results demonstrate the antioxidant potential of the species without showing toxicity.

Complement activation-related pseudoallergy in dogs following intravenous administration of a liposomal formulation of meglumine antimoniate / Pseudoalergia relacionada à ativação do complemento em cães após administração intravenosa de uma formulação lipossomal de antimoniato de meglumina

The increasing use of nanotechnologies in advanced therapies has allowed the observation of specific adverse reactions related to nanostructures. The toxicity of a novel liposome formulation of meglumine antimoniate in dogs with visceral leishmaniasis after single dose has been investigated. Groups of 12 animals received by the intravenous route a single dose of liposomal meglumine antimoniate (group I [GI], 6.5 mg Sb/kg), empty liposomes (GII) or isotonic saline (GIII). Evaluation of hematological and biochemical parameters showed no significant changes 4 days after administration. No undesired effects were registered in the GIII. However, adverse reactions were observed in 67.7% of dogs from both groups that received liposomal formulations. The side effects began moments after bolus administration and disappeared during the first 15 minutes after treatment. Prostation, sialorrhea and defecation were the most frequent clinical signs, registered in 33.3% and 41.6 % of animals from the groups GI and GII, respectively. Tachypnea, mydriasis, miosis, vomiting and cyanosis were also registered in both groups. The adverse reactions observed in this study were attributed to the activation of the complement system by lipid vesicles in a phenomenon known as Complement Activation-Related Pseudoallergy (CARPA). The influence of the physical-chemical characteristics of liposomal formulation in the triggering of CARPA is discussed.

O crescente uso das nanotecnologias nas terapias avançadas tem permitido a observação de reações adversas específicas relacionadas às nanoestruturas. A toxicidade de uma nova formulação lipossomal de antimoniato de meglumina após dose única foi avaliada em cães com leishmaniose visceral. Grupos de 12 animais receberam por via intravenosa uma dose única de antimoniato de meglumina lipossomal (grupo I [GI], 6,5 mg Sb/kg), lipossomas vazios (GII) ou solução salina isotônica (GIII). A avaliação de parâmetros hematológicos e bioquímicos não revelou alterações significativas quatro dias após a administração. Nenhum efeito indesejável foi registrado no GIII. No entanto, reações adversas foram observadas em 67,7% dos cães de ambos os grupos que receberam formulações lipossomais. Os efeitos colaterais iniciaram momentos após a administração em "bolus" e desapareceram no decurso dos primeiros 15 minutos após o tratamento. Prostração, sialorréia e defecação foram os sinais clínicos mais frequentes, registrados em 33,3% e 41,6% dos animais dos grupos GI e GII, respectivamente. Taquipnéia, midríase, miose, vômitos e cianose também foram registrados em ambos os grupos. As reações adversas observadas neste trabalho foram atribuídas à ativação do sistema complemento pelas vesículas lipídicas em fenômeno conhecido como Pseudoalergia Relacionada à Ativação do Complemento (PARAC). A influência das características físico-químicas da formulação lipossomal no desencadeamento de PARAC é abordada.

Toxicological evaluation of vegetable oils and biodiesel in soil during the biodegradation process

Vegetable oils and their derivatives, like biodiesel, are used extensively throughout the world, thus posing an environmental risk when disposed. Toxicity testing using test organisms shows how these residues affect ecosystems. Toxicity tests using earthworms (Eisenia foetida. are widespread because they are a practical resource for analyzing terrestrial organisms. For phytotoxicological analysis, we used seeds of arugula (Eruca sativa and lettuce (Lactuca sativa. to analyze the germination of seeds in contaminated soil samples. The toxicological experiment was conducted with four different periods of biodegradation in soil: zero days, 60 days, 120 days and 180 days. The studied contaminants were soybean oil (new and used) and biodiesel (B100). An evaluation of the germination of both seeds showed an increased toxicity for all contaminants as the biodegradation occurred, biodiesel being the most toxic among the contaminants. On the other hand, for the tests using earthworms, the biodiesel was the only contaminant that proved to be toxic. Therefore, the higher toxicity of the sample containing these hydrocarbons over time can be attributed to the secondary compounds formed by microbial action. Thus, we conclude that the biodegradation in soil of the studied compounds requires longer periods for the sample toxicity to be decreased with the action of microorganisms.

Eficácia e toxicidade do pó comercial de Hoodia gordonii (Masson) swet ex decne utilizado no tratamento da obesidade / Efficacy and toxicity of Hoodia gordonii commercial powder used to combat obesity

A obesidade é atualmente o principal problema de saúde em países desenvolvidos e em desenvolvimento. Diversos recursos terapêuticos têm sido empregados para o tratamento da obesidade destacando-se os fitoterápicos, consagrados pelo conhecimento popular. Nesse contexto, a planta Hoodia gordonii tem despertado atualmente grande interesse mundial, principalmente pelas recentes descobertas e comprovações científicas da inibição do apetite e da sede pelo glicosídeo ativo P57 isolado de espécies da planta. Apesar disso, tais efeitos ainda não foram avaliados e comprovados em amostras comerciais do pó de H. gordonii (PHG), não existindo evidências científicas que garantam a sua eficácia e segurança. Portanto, o objetivo deste trabalho foi realizar ensaios biológicos com ratos para avaliar a atividade farmacológica e a toxicidade de amostras comerciais do pó de H. gordonii. As amostras foram administradas por gavagem em doses equivalentes a 20 vezes as recomendadas para humanos em ratas Wistar durante 4 semanas sendo avaliados os parâmetros indicadores do efeito terapêutico. Após as 4 semanas, os animais foram sacrificados, e amostras de sangue e órgãos foram coletados e submetidos à avaliação dos indicadores metabólicos, endócrinos, hematológicos e histopatológicos. Os resultados demonstraram que para todos os parâmetros avaliados não houve diferenças significativas entre o grupo controle que recebeu somente solução salina estéril e os grupos tratados com PHG indicando que os mesmos, apesar de não apresentarem quaisquer indícios de toxicidade, são incapazes de produzir os supostos efeitos de inibição de apetite e consequente tratamento da obesidade.

Obesity is currently the main health problem in developed and developing countries. Several therapeutic methods have been employed for the treatment of obesity, especially herbal medicines, highlighted by popular knowledge. In this context, the plant Hoodia gordonii has currently aroused great interest worldwide, especially for recent discoveries and scientific proof of inhibition of appetite and thirst by the active glycoside P57 isolated from plant species. Nevertheless, such effects have not been evaluated and proven for commercial samples of H. gordonii powder (PHG), with no scientific evidence to ensure its effectiveness and safety. Therefore, the aim of this study was to conduct biological tests with rats to evaluate the pharmacological activity and toxicity of commercial samples of H. gordonii powder. The samples were administered through gavage, at doses equivalent to 20 times those recommended for humans, in female Wistar rats during 4 weeks for evaluation of the parameters indicative of therapeutic efficacy. After 4 weeks, the animals were sacrificed and blood and organ samples were collected and subjected to the evaluation of metabolic, endocrine, hematological and histopathological indicators. Results showed that for all evaluated parameters, there were no significant differences between the control group that only received sterile saline solution and the groups treated with PHG, indicating that the latter, although presenting no evidence of toxicity, are unable to produce the alleged effects of appetite inhibition and subsequent obesity treatment.

Problemas associados ao uso de plantas medicinais comercializadas no Mercadão de Madureira, município do Rio de Janeiro, Brasil / Problems associated with the use of medicinal plants commercialized in "Mercadão de Madureira", Rio de Janeiro City, Brazil

O uso de plantas medicinais pela população brasileira é prática tradicional, sendo muitas vezes o único recurso utilizado na atenção básica de saúde. O uso terapêutico dessas plantas envolve várias etapas da cadeia produtiva, sendo a procedência, coleta, secagem, armazenamento, comércio, modo de preparo pelo usuário e uso. O objetivo desse trabalho documental, de caráter exploratório, foi levantar a produção científica existente sobre os problemas associados a cada uma dessas etapas e discutir as questões relacionadas à carência de estudos para comprovar a eficácia farmacológica e a ausência de riscos toxicológicos, bem como a prática de autodiagnóstico. As vinte plantas mais comercializadas em grande mercado do município do Rio de Janeiro em agosto de 2007 serviram de base para o levantamento documental do presente estudo. Dessas, seis apresentaram propriedades tóxicas comprovadas dependendo do preparo e uso, a arnica (Solidago chilensis Meyen), aroeira (Shinus terebinthifolius Raddi.), arruda (Ruta graveolens L.), babosa (Aloe vera L.), confrei (Symphytum officinale L.) e poejo (Mentha pulegium Lam. & DC.). A Agência Nacional de Vigilância Sanitária aponta contra indicações para boldo-do-Chile (Peumus boldus Molina), chapéu-de-couro (Echinodorus macrophyllus Micheli), erva-cidreira (Lippia alba N.E.Br.), erva-de-bicho (Polygonum spp.), espinheira-santa (Maytenus spp.), picão (Bidens pilosa L.), poejo (Mentha pulegium Lam.) e tanchagem (Plantago major L.). O abajerú, arnica, boldo-do-Chile, confrei, erva-de-bicho e espinheira-santa tiveram relato de problemas de identificação na coleta e comercialização frente a outras morfologicamente semelhantes. Plantas cultivadas e silvestres apresentam variabilidade de princípios ativos influenciados por fatores ambientais e genéticos, como chapéu-de-couro (Echinodorus macrophyllus Micheli), erva-cidreira (Lippia alba N.E.Br.) e erva-de-bicho (Polygonum spp.). A contaminação e o comprometimento da preservação dos princípios ativos pela secagem e armazenamento inadequados foram relatados para o guaco (Mikania glomerata Sprengel), camomila (Chamomilla recutita L.), erva-cidreira, chapéu-de-couro e boldo-do-Chile (Peumus boldus Molina). Pode-se constatar que todas as etapas da cadeia produtiva das plantas medicinais apresentam desafios para que se possa garantir identificação da espécie, disponibilidade, qualidade, segurança e eficácia de uso.

The use of medicinal plants by the Brazilian population is a traditional practice and is often the main resource used in primary healthcare. The therapeutic use of these plants involves several steps in the supply chain: origin, harvest, drying, storage, form of preparation by the user and use. The aim of this documental study of exploratory nature was to survey the scientific literature about the problems associated with each of those steps and discuss the issues related to the lack of studies to prove the pharmacological efficacy and the absence of toxicological risks, as well as the autodiagnosis practice. The 20 plants most commercialized in a large market of Rio de Janeiro City in August 2007 were the basis for the documental survey of the present study. Of these, six had proven toxic properties depending on their preparation and use: arnica (Solidago chilensis Meyen), aroeira (Shinus terebinthifolius Raddi.), rue (Ruta graveolens L.), "babosa" (Aloe vera L.), comfrey (Symphytum officinale L.) and pennyroyal (Mentha pulegium Lam. & DC.). The National Agency for Sanitary Surveillance shows contraindications for: "boldo-do-Chile" (Peumus boldus Molina), "chapéu-de-couro" (Echinodorus macrophyllus Micheli), lemon balm (Lippia alba N.E.Br.), "erva-de-bicho" (Polygonum spp.), "espinheira-santa" (Maytenus spp.), "picão" (Bidens pilosa L.), pennyroyal (Mentha pulegium Lam.) and plantain (Plantago major L.). "Abajerú", arnica, "boldo-do-Chile", comfrey, "erva-de-bicho" and "espinheira-santa" were reported to show identification problems in the harvest and in the commercialization compared to morphologically similar plants. Cultivated and wild plants showed variability in active principles influenced by environmental and genetic factors: "chapéu-de-couro" (Echinodorus macrophyllus Micheli), lemon balm (Lippia alba N.E.Br.) and "erva-de-bicho" (Polygonum spp.). Contamination and compromising of the preservation of active principles due to inadequate drying and storage was reported for guaco (Mikania glomerata Sprengel), camomile (Chamomilla recutita L.), lemon balm, "chapéu-de-couro" and "boldo-do-Chile" (Peumus boldus Molina). All stages of the supply chain of medicinal plants constitute challenges to ensure the proper species identification, availability, quality, safety, and efficacy of their use.

Characterization of a Mutant Bacillus thuringiensis d-endotoxin with enhanced stability and toxicity / Caracterización de una delta endotoxina mutante de Bacillus thuringiensis con estabilidad y toxicidad aumentadas

The centrally located a-helix 5 of Bacillus thuringiensis d-endotoxins is critical for insect toxicity through ion-channel formation. We analyzed the role of the highly conserved residue Histidine 168 (H168) using molecular biology, electrophysiology and biophysical techniques. Toxin H168R was ~3-fold more toxic than the wild type (wt) protein whereas H168Q was 3 times less toxic against Manduca sexta. Spectroscopic analysis revealed that the H168Q and H168R mutations did not produce gross structural alterations, and that H168R (Tm= 59 °C) was more stable than H168Q (Tm= 57.5 °C) or than the wt (Tm= 56 °C) toxins. These three toxins had similar binding affinities for larval midgut vesicles (Kcom) suggesting that the differences in toxicity did not result from changes in initial receptor binding. Dissociation binding assays and voltage clamping analysis suggest that the reduced toxicity of the H168Q toxin may result from reduced insertion and/or ion channel formation. In contrast, the H168R toxin had a greater inhibition of the short circuit current than the wt toxin and an increased rate of irreversible binding (kobs), consistent with its lower LC50 value. Molecular modeling analysis suggested that both the H168Q and H168R toxins could form additional hydrogen bonds that could account for their greater thermal stability. In addition to this, it is likely that H168R has an extra positive charge exposed to the surface which could increase its rate of insertion into susceptible membranes.

La a-Hélice 5 del domino I de las d-endotoxinas de Bacillus thuringiensis, es crítica para la toxicidad de las toxinas contra insectos al participar en la formación de canales iónicos. La participación en la función tóxica del residuo Histidina 168 (H168) –el cual es altamente conservado– fue estudiada mediante técnicas de biología molecular, electrofisiología y biofísica. La toxina mutante H168R fue ~ 3 veces más tóxica que la toxina silvestre (ts) en Manduca sexta, mientras que H168Q fue 3 veces menos tóxica. Los análisis espectroscópicos indicaron que las mutaciones no producen alteraciones estructurales significativas y que la toxina H168R (Tm= 59 °C) es más estable que las toxinas H168Q (Tm= 57.5 °C) y wt (Tm= 56 °C). Las tres toxinas exhibieron uniones de afinidad similares (Kcom) en vesículas de intestino de larvas de insecto, indicando que las diferencias en la toxicidad no se deben a cambios en la unión inicial al receptor. Los ensayos de unión/disociación y fijación de voltaje mostraron que la reducción de la toxicidad de la toxina H168Q se puede atribuir a una disminución en la inserción y/o en la formación de canales iónicos. De otro lado, H168R mostró una inhibición a la corriente de corto circuito mayor que la ts y un aumento en unión irreversible (kobs), lo cual es consistente con un menor valor de CL50. La modelación molecular sugiere que H168Q y H168R forman puentes de hidrógeno adicionales, lo que les confiere mayor estabilidad térmica. Adicionalmente, es probable que H168R tenga una carga positiva extra expuesta en la superficie, lo cual aumentaría su tasa de inserción en membranas susceptibles.

Avaliação da qualidade ambiental do rio Itaguaré, Bertioga-SP,com base em testes de toxicidade e indicadores microbiológicos de balneabilidade / Evaluation of environmental quality of Itaguaré river, Bertioga-SP, using-toxicity tests and microbiological bathing conditions indexes / Evaluación de la calidad ambiental del río Itaguaré, Bertioga-SP, usar pruebasde toxicidad y índices de baño microbiológicos de las condiciones

De acordo com as Resoluções CONAMA n. 274/2000 e n. 357/2005, indicadores de balneabilidade e toxicidade devem ser avaliados em um corpo receptor aquático com objetivo de prever e evitar efeitos adversos à saúde humana e à biota aquática. O presente trabalho avaliou a qualidade das águas do rio Itaguaré (Bertioga-SP) em cinco pontos distintos, os quais se diferenciam quanto à ocupação de suas margens. Para tal, foram realizados ensaios ecotoxicológicos, mensuração da concentração de coliformes termotolerantes e parâmetros físico-químicos. Foram realizados ensaios de toxicidade aguda conforme ABNT 12713 (2004) e crônica, conforme ABNT 13373 (2005) utilizando-se cladóceros como organismos-teste, além da mensuração de coliformes termotolerantes por meio da técnica de tubos múltiplos conforme APHA (2005), para detecção e quantificação de poluição fecal por animais homeotérmicos. Os resultados indicaram toxicidade aguda no Rio Itaguaré apenas no outono nos pontos 1, 2 e 3, enquanto que a toxicidade crônica foi observada em todas as estações nos pontos 1 e 2; e, em todos os pontos (1, 2, 3, 4 e 5) na primavera e outono. Os níveis de coliformes termotolerantes demonstraram baixas concentrações que permitiram a classificação quanto à balneabilidade como excelente ou muito boa conforme CONAMA n. 274/2000. No entanto, houve maiores concentrações de coliformes nos pontos 1 e 2 durante todos os meses onde também se observou toxicidade. Esses resultados sugerem a presença de efluentes domésticos causando alterações significativas na qualidade da água nesses pontos 1 e 2, localizados próximos à Rodovia Manoel Hypólito do Rego.

According to Resolutions CONAMA N. 274/2000and N. 357/2005, bathing conditions and toxicity must be evaluated in an aquatic receiving body to foresee and prevent adverse effects to human health and aquatic biota. The present work evaluated the quality of waters of Itaguaré River (Bertioga - São Paulo) in five different points which differ as regards the occupation of its edges. For doing this, we applied eco-toxicological tests, measured the concentration of thermotolerant coliformis and physical-chemical parameters. We did tests of acute toxicity following ABNT 12713 (2004) and chronic toxicity following ABNT 13373 (2005) using cladocera as test-organisms, in addition to measuring thermotolerant coliformis through the technique of multiple pipes (APHA 2005), for detecting and quantificating fecal pollution by homeothermic animals. Results showed acute toxicity in Itaguaré River only in the autumn in points 1, 2 and 3, whereas chronic toxicity was observed in all seasons in points 1 and 2; and, in all the points (1, 2, 3, 4 and 5) in the spring and autumn. The levels of thermotolerant coliformis had low concentrations classified, as regards bathing conditions as excellent or very good cf. CONAMA N. 274/2000. However, there were greater concentrations of coliformis in points 1 and 2 during all months, and toxicity was also observed. These results suggest the presence of domestic effluent causing significant alterations in water quality in points 1 and 2, located next to Manoel Hypólito do Rego Highway.

Según las resoluciones CONAMA N. 274/2000 e N. 357/2005, se debe evaluar las condiciones del baño y la toxicidad en un cuerpo de recepción acuático para prever y prevenir efectos nocivos a la salud humana y a la biota acuática. Este trabajo evaluó la calidad de aguas del río Itaguaré (Bertioga - São Pablo) en cinco puntos distintos que se diferencian en lo que concierne a la ocupación de sus bordes. Como para hacerlo, hicimos pruebas eco-toxicológicas, medidas de la concentración de coliformis termotolerantes y parámetros fisicoquímicos. Hicimos pruebas de la toxicidad aguda según ABNT 12713 (2004) y de la toxicidad crónica según ABNT 13373 (2005) usando cladocera como organismos de prueba, además de medir coliformis termotolerantes con la técnica de las pipas múltiples (APHA 2005), para detectar y cuantificar la contaminación fecal por los animales homeotérmicos. Los resultados demostraron toxicidad aguda en el río Itaguaré solamente en el otoño en los puntos 1, 2 y 3, mientras que la toxicidad crónica fue observada en todas las estaciones en los puntos 1 y 2; y, en todos los puntos (1, 2, 3, 4 y 5) en la primavera y el otoño. Los niveles de coliformis termotolerantes tenían concentraciones bajas; en lo que concierne las condiciones de baño han sido excelentes o muy buenos según CONAMA N. 274/2000. Sin embargo, hubo mayores concentraciones de coliformis en los puntos 1 y 2 durante todos los meses, y la toxicidad también fue observada ahí. Estos resultados sugieren la presencia de efluentes domésticos que causa alteraciones significativas en calidad del agua en los puntos 1 y 2, localizados al lado de la autopista Manoel Hypólito hacen la carretera de Rego.

Simultaneous detection of three antineoplastic drugs on gloves by liquid chromatography with diode array detector

The aim of this study was to develop a method for simultaneous detection of antineoplastic drugs on gloves since, in occupational exposure, the main contamination route is through dermal contact, which may occur via prolonged contact with contaminated surfaces or materials. The assay was performed by liquid chromatography using the following conditions for the detection of 5-fluorouracil (5-FU), methotrexate (MTX) and paclitaxel (TAX): diode array detection and UV quantification at 195 nm for TAX, at 265 nm for 5-FU and at 302 nm for MTX; ODS column (250 x 4 mm, 5 μm) with a similar guard column; mobile phase consisted of water (pH 4)-methanol-acetonitrile (35:15:50, v/v/v) with a flow rate of 1 mL min-1. The method presented a linear range from 0.25 to 20 μg mL-1 with r² higher than 0.99. Repeatability was <15% and satisfactory extraction efficiency was obtained when liquid-liquid extraction with ethyl acetate was used for 5-FU and TAX. Satisfactory solid phase extraction was also achieved with C18 cartridges and elution with methanol for MTX. The diode array detector allowed drug quantification at a concentration > 0.25 μg mL-1 in samples, although detection was possible in samples that presented values of around 0.1 μg mL-1. The results obtained suggest that the method developed can be applied for the simultaneous determination of the drugs studied and can be considered useful in exposure assessment for health care workers.

O objetivo deste estudo foi desenvolver um método para a detecção simultânea de antineoplásicos em luvas, uma vez que, em exposições ocupacionais, a principal via de introdução é a dérmica, por meio de contato prolongado com superfícies e/ou materiais contaminados com tais fármacos. A tecnica de detecção utilizada foi a cromatografia líquida de alta eficiência, com detector de aranjo de diodos, nas seguintes condições: para a detecção de 5-fluorouracila (5-FU), metotrexato (MTX) e paclitaxel (TAX): detecção e quantificação de TAX a 195 nm, de 5-FU a 265 nm e de MTX a 302 nm; coluna ODS (250 x 4 mm, 5 μm), com pré-coluna similar; fase móvel constituída de água (pH 4)-metanol-acetonitrila (35:15:50, v/v/v), na vazão de 1 mL min-1. O método apresentou uma faixa linear de 0,25-20 mg mL-1, com r² > 0,99. O desvio-padrão relativo, para a avaliação da repetibilidade foi < 15%; a recuperação foi satisfatória, empregando extração líquido-líquido, com acetato de etila, para a 5-FU e TAX e extração em fase sólida, com cartuchos de C18 e eluição com metanol, para MTX. O detector de arranjo de diodos permitiu a quantificação dos fármacos, quando presentes nas amostras em concentração > 0,25 mg mL-1, embora a detecção foi possível nas amostras que apresentaram valores em torno de 0,1 mg mL-1. Os resultados obtidos sugerem que o método desenvolvido pode ser aplicado para a determinação simultânea dos fármacos estudados, constituindo ferramenta útil na avaliação da exposição dos trabalhadores as fármacos antineoplásicos.

Toxicidad por insecticidas organofosforados en fumigadores de Campaña contra el Dengue, estado Aragua, Venezuela, año 2008 / Toxicity by organophosphate insecticides of fumigators working on the dengue control campaign in Aragua state, Venezuela, 2008

Un estudio descriptivo sobre las condiciones de salud y su relación con la exposición a plaguicidas, de los “fumigadores” de la campaña contra el dengue en el estado Aragua, fue realizado en una muestra no probabilística de 50 trabajadores, a los cuales se les aplicó una encuesta para investigar: características personales y de trabajo, conocimientos sobre insecticidas y enfermedades asociadas, además de inspeccionar locales, equipos y condiciones de trabajo. De la muestra general, 28% resultaron fumadores. Los grados de instrucción predominantes fueron primaria y secundaria (44%). El promedio de años como fumigador fue de 14,3. Sólo 40% tiene conocimiento de enfermedades producidas por organofosforados, 62% presentó antecedentes de intoxicación. 30% refirieron presentar enfermedades cardiovasculares, gastrointestinales y neurológicas. A mayor cantidad de años de labor, mayor la intensidad de signos y síntomas llegando a producir enfermedades. 38% de los niveles de Acetilcolinesterasa medidos, resultaron alterados. Las variables: grupo de edad, grado de instrucción, fumar, años de labor, falta de conocimiento de enfermedades y antecedentes de intoxicación, se asociaron a valores anormales de colinesterasa, sin presentar significancia estadística (P>0,05). La selección de los trabajadores, su capacitación, dotación de equipos y materiales adecuados, su vigilancia clínica epidemiológica, su evaluación permanente y su respectivo tratamiento deben ser revisados y tenidos en cuenta por la Corporación de Salud del estado Aragua (CORPOSALUD), haciéndolas, normas de obligatorio cumplimiento

A descriptive study on the conditions of health and their relation to the exhibition to pesticides, and of the “fumigators” of the campaign against dengue in the Aragua state, sampled 50 workers, to whom a survey was applied to investigate: personal characteristics of work, knowledge on insecticides and diseases, besides an inspection the premises, equipment and work environment. From this general sample 28% were smokers. The predominant educational level was elementary school and high school (44%). The fumigator average of working years was of 14.3. Only 40% had knowledge of diseases produced by organophosphate, 62% presented poisoning antecedents. 30% claimed to display cardiovascular, gastrointestinal and neurological diseases. The greater the number of work years, the greater the intensity of signs and symptoms of associated diseases. 38% of the measured levels of acetylcholinesterase were altered. The variables: smoking, years of work, educational level, age group and the lack of knowledge of diseases and intoxication antecedents were associated with abnormal values of acetylcholinesterase, without showing statistical significance. The selection of the workers, their qualification and suitable equipment and materials, their clinical epidemiologic monitoring, their permanent evaluation and respective treatment must be reviewed and taken into account by CORPOSALUD (Corporación de Salud del estado Aragua), making them norms of obligatory fulfillment

Avalação de efeitos toxicológicos e comportamentais da Hypericum perforatum e da Pipe methysticum em ratos / Hypericum perforatum and Piper methysticum are phytotherapics frequently employed for the treatment of mild to moderate central nervous system depression

There is no conclusive information in literature about the adverse side effects in human health. The aim of this study was to assess if these phytotherapics can promote toxic and/or behavioral alterations in rats. Adult male Wistar rats (17) were randomly divided into three groups. Two experimental groups (n=6) were treated by gavage with an aqueous solution obtained from commercial extracts of H. perforatum (15 per cent m/v - 2 mg/kg/day of hypericine) or P. methysticum (7.5 per cent m/v - 85.7 mg/kg/day of kavapirones). The control group (n=5) received only water by gavage. At day 31 the animal behavior was analyzed in the open field, elevated plus-maze and employing the forced swimming test. The animals were sacrificed for serum and tissues samples collection, allowing the biochemical and histopathological studies. The statistical analysis employed revealed no behavioral changes and absence of alterations at the parameters body weight gain, foodand water intake, ALT, AST, urea and creatinine serum levels, and in the histopathological study. The data obtained show that rats treated with the respective plants aqueous solutions, did not present behavioral alterations or toxic effects.

As ervas Hypericum perforatum e Piper methysticum são frequentemente empregadas no tratamento de depressões leves a moderadas. O presente trabalho objetivou analisar efeitos tóxicos e alterações comportamentais desses fitoterápicos em ratos. Foram utilizados 17 ratos machos Wistar adultos, separados em três grupos: controle (n=5) e experimentais (n=6/grupo). Os animais experimentais receberam, por gavagem, soluções aquosas de H. perforatum (15 por cento m/v) contendo 2 mg/kg de hipericina, ou de P. methysticum (7,5 por cento m/v) contendo 85,7 mg/kg de kavapironas, diariamente durante 30 dias. Um dia após término do tratamento, os animais tiveram o comportamento avaliado no campo-aberto, no labirinto em cruz elevado e pelo emprego do teste da natação forçada. Em seguida, os animais foram submetidos à eutanásia para a coleta de amostras de sangue e tecidos para estudos bioquímicos e histopatológicos. A análise estatística dos dados indicou que as soluções aquosas empregadas não foram capazes de promover alterações comportamentais nem toxicidade, por não terem sido observadas alterações nos parâmetros ganho de peso, ingestão hídrica, consumo de ração, níveis séricos de ALT, AST, uréia e creatinina, e no estudo histopatológico. Portanto, o presente trabalho sugere que os fitoterápicos, nas dosagens e tempo de administração, empregados não foram capazes de causar toxicidade e alterações comportamentais em ratos.

Antimicrobial and toxicological studies of some metal complexes of 4-methylpiperazine-1-carbodithioate and phenanthroline mixed ligands

A few mixed ligand transition metal carbodithioate complexes of the general formula [M(4-MPipzcdt)x(phen)y]Y (M = Mn(II), Co(II), Zn(II); 4-MPipzcdt = 4-methylpiperazine-1-carbodithioate; phen = 1,10-phenanthroline; x = 1 and y = 2 when Y = Cl; x = 2 and y = 1 when Y = nil) were synthesized and screened for their antimicrobial activity against Candida albicans, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa,Staphylococcus aureus andEnterococcusfaecalis by disk diffusion method. All the complexes exhibited prominent antimicrobial activity against tested pathogenic strains with the MIC values in the range <8-512 ìgmL-1. The complexes [Mn(4-MPipzcdt)2(phen)] and [Co(4-MPipzcdt)(phen)2]Cl inhibited the growth of Candida albicans at a concentration as low as 8 µgmL-1.The complexes were also evaluated for their toxicity towards human transformed rhabdomyosarcoma cells (RD cells). Moderate cell viability of the RD cells was exhibited against the metal complexes.

Inibidores da angiogênese e seus efeitos cardiovasculares no paciente com câncer: importância do manejo multidisciplinar / Angiogenesis inhibitors and cardiovascular adverse effects in cancer patients: the importance of multidisciplinary management

A angiogênese tem papel fundamental no crescimento tumoral. Células neoplásicas secretam fator de crescimento do endotélio vascular (vascular endothelial growthfactor - VEGF-A), estímulo para formação de nova vascularização, que promove suprimento sanguíneo às células tumorais e permite seu crescimento, invasão e metastatização. Os inibidores da angiogênese agem por meio da ligação inibitória ao VEGF (bevacizumabe) ou bloquando o receptor do VEGF-A (sunitinibe e sorafenibe). Seus efeitos antiangiogênicos incluem regressão e inibição da formação de neovasos. Essas medicações atualmente têm ampla utilização em terapias oncológicas. São agentes comercializados pela primeira vez em câncer colorretal metastático (becacizumabe) em 2004, mas que vêm desde então expandindo suas indicações: câncer de pulmão metastático (2006), carcinoma de células renais (2006), câncer de mama metastático (2008), glioblastoma multiforme recidivado (2008) e hepatocarcinoma avançado (2008). estudos atuais investigam o impacto da introdução desses agentes de maneira cada vez mais precoce na evolução da doença. Com isso, aumentam o tempo de exposição dos pacientes ao medicamento e o risco de seus efeitos colaterais. Viabiliza-se, portanto, o surgimento dos efeitos adversos tardios, até então pouco conhecidos, exigindo vigilância constante tanto clínica como epidemiológica. Os efeitos adversos...

Venous thromboembolism is a serious and potentially fatal disorder, which complicates the course of 20% of cancer patients, and has a significant impact on the quality of life and clinical outcomes of these patients. The pathophysiology of the association between thrombosis and cancer is complex. Malignancy is associated with a baseline hypercoagulable state secondary to the release of inflammatory cytokines, activation of the clotting system, expression of hemostatic proteins on tumor cells, inhibition of natural anticoagulants and impaired fibrinolysis. Several risk factors have been identified as contributing to venous thromboembolism and may be related to the patient characteristics, to the disease, and to the therapeutic interventions. The use of heparins and fondaparinux is indicated for selected cancer patients according to the types of malignancies and treatments. The treatment of venous thromboembolism in patients with cancer is challenging: the complications associated with the use of anticoagulants are significantly higher, may interfere with anticancer therapy and have a negative impact on quality of life.